EZTrans細胞轉染試劑作為新一代的轉染試劑,其轉染原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進入細胞。本產品經過李記生物的優化處理,具有轉染效率高,細胞毒性低,操作簡單,重復性好,適用范圍廣等特點。...
CellCountingKit-8(簡稱CCK8)試劑可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。相信做細胞的同學對他都很熟悉,你確定你使用CCK-8試劑的方式是*正確的嗎?使用CCK-8要注意的事項有哪些:1.酚紅和血清對CCK8法的檢測不會造成干擾,可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去。2.CCK8可以檢測大腸桿菌,但不能檢測酵母細胞。在細胞增殖實驗每次測定的過程中需要避免細菌污染,以免影響結果。3.當在培養箱內培養時,培養板最外一圈的孔最容易干燥揮發,由于體積不準確而增加誤...
胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采取胎牛血獲取的血清,因其未與外界環境接觸,所以血清內IgG等免疫因子相對含量較少,適合用于免疫類細胞的培養。胎牛血清與新生牛血清在蛋白組成上的差異還是很明顯的。首先,胎牛血清總蛋白含量(g/dl)約為2%-4%,新生牛血清約為3.0%-5.0%,成牛血清則高達8%-10%.從蛋白含量上也可以初步判斷一個血清是否為胎牛或新生牛血清,蛋白含量越高說明牛齡越大,目前檢測蛋白含量是初步檢測一項重...
細胞轉染是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。常規轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩定轉染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數,產生高水平的表達,但通常只持續幾天,多用于啟動子和其它調控元件的分析。一般來說,超螺旋質粒DNA轉染效率較高,在轉染后24-72小時內(依賴于各種不同的構建)分析結果,常常用到一些報告系統如熒光蛋白,β半乳糖苷酶等來幫...
一、什么是細胞增殖細胞增殖是生物體的重要生命特征,細胞以分裂的方式進行增殖。單細胞生物,以細胞分裂的方式產生新的個體。多細胞生物,以細胞分裂的方式產生新的細胞,用來補充體內衰老或死亡的細胞。二、細胞增殖的意義和方式意義:細胞增殖是生活細胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細胞的增殖是生物體生長、發育、繁殖以及遺傳的基礎。方式:真核生物的分裂依據過程不同有三種方式,有有絲分裂,無絲分裂,減數分裂。其中有絲分裂是人、動物、植物、真菌等一切真核生物中的一種zui為普遍的分...
在Western實驗中,蛋白Marker可以監控蛋白質在SDS-PAGE中的遷移,監控蛋白的轉膜效率,確定蛋白分子量大小。選擇正確的蛋白Marker是westernblot實驗成功的條件之一。蛋白Marker分為兩種:一種是未預染的Marker,即寬分子量蛋白標準,高分子量蛋白標準及低分子量蛋白標準;另一種是預染的Marker,即單色預染和多色預染。一、未預染蛋白Marker未預染的蛋白Marker是簡單,也是最準確的一種,由于沒有附帶染料分子或者標記大小正好是蛋白原本的大小...
在細胞培養過程中,經常加入5%-20%的Gibco胎牛血清,最常使用的Gibco胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜,影響后續實驗的結果,我們在實驗中使用10%的Gibco澳洲胎牛血清培養293T細胞,效果非常好。但是有些細胞也會使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清,要根據具體細胞選擇合適的Gibco胎牛血清濃度。為防止客戶由于操作方面而使黑點生成的辦法。對此一定要做好以下幾點。方可使細胞培養順利。(1)盡可能地減少血清凍融次數。(...
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